MS-級 Thermo Scientific Pierce 胰蛋白酶/Lys-C 蛋白酶混合物是一種胰蛋白酶和 LysC 的質譜 (MS) 級絲氨酸胞內蛋白酶混合物，與單獨使用胰蛋白酶相比，可以同時酶切蛋白以實現更有效的酶切。

MS 級 Pierce 胰蛋白酶/Lys-C 蛋白酶混合物的特點包括：
•增強酶切 — 酶組合可減少胰蛋白酶缺失切割
•便利 — 胰蛋白酶和 LysC 蛋白酶以優化的比值提供，以組合使用形式進行酶切
•出色的選擇性 — 胰蛋白酶具有 >95% 的 C 端賴氨酸和精氨酸特異性；LysC 具有 >90% 的 C 端賴氨酸切割特異性
•穩定 — 酶混合物以凍干形式提供

通過 MS 以高效、可重現的蛋白酶切開始進行蛋白表征、鑒別和定量。盡管胰蛋白酶通常用于蛋白酶切，但單獨這一種蛋白酶并不足以完全酶切賴氨酸和精氨酸殘基的羧基端的蛋白。因此，Lys-C 蛋白酶通常與胰蛋白酶共同作用，以連續酶切蛋白，缺失切割較少。Pierce 胰蛋白酶/Lys-C 蛋白酶混合物是胰蛋白酶和 LysC 蛋白酶的凍干混合物，已經過優化以提高蛋白酶切效率。它以 20 µg、5 x 20 µg 或 100 µg 靈活規格提供，也包括在 EasyPep Mini MS 樣品制備試劑盒中。

此混合物中 MS 級胰蛋白酶源自豬胰腺提取物，經 TPCK 處理以消除糜蛋白酶活性并甲基化以改善酶切期間的穩定性。MS 級 Lys-C 蛋白酶是一種從產酶溶桿菌中高度純化的天然酶。與胰蛋白酶不同，Lys-C 可以切割賴氨酸然后切割脯氨酸，是與其他蛋白酶配合使用實現較佳的蛋白酶切的理想選擇。當作為混合物使用時，根據酶與蛋白比值，酶切可在短短 1.5–3 小時內完成或者過夜。在 -20°C 下儲存時，該凍干酶混合物可保持穩定一年。

• 出色的選擇性—胰蛋白酶具有 >95% 的 C 端賴氨酸和精氨酸特異性；LysC 具有 >90% 的 C 端賴氨酸切割特異性
• 高純度—未檢測到胰凝乳蛋白酶活性（胰蛋白酶）
• 完全酶切—胰蛋白酶/LysC 酶組合可減少胰蛋白酶缺失切割
• 增強穩定性—胰蛋白酶經過化學修飾可降低自溶活性
• 便利—酶以穩定的凍干或液體形式提供

胰蛋白酶是一種源自豬胰腺提取物的質譜 (MS) 級絲氨酸蛋白酶，特異性切割賴氨酸和精氨酸殘基的羧基側。該酶經過 TPCK 處理消除了糜蛋白酶活性，并通過甲基化進行化學修飾，得到高活性和更穩定的酶形式。胰蛋白酶可耐受常用的部分變性條件，如 0.1 SDS、1 M 尿素和 10% 乙腈。Pierce 胰蛋白酶在 pH 7-9 范圍內活性較佳，在 pH < 4 條件下可逆失活。胰蛋白酶以 1 mg、5 包 20 µg 或 100 µg 的凍干粉和 100 µg 溶液的形式提供。

Lys-C 蛋白酶是從產酶溶桿菌中分離獲得的質譜 (MS) 級絲氨酸蛋白酶。Lys-C 蛋白酶對賴氨酸殘基具有較高的活性和特異性，與胰蛋白酶（即較少的肽段）相比，肽段較大，樣品的復雜性較低。與胰蛋白酶不同，Lys-C 蛋白酶可以先切割賴氨酸然后切割脯氨酸，這使其適用于序列蛋白酶切，然后進行胰蛋白酶酶切，以減少切割缺失。這些獨特的 Lys-C 蛋白酶特性可確保單獨使用或隨后進行胰蛋白酶酶切時的高酶切效率。此外，Lys-C 原型肽通常具有較高的電荷狀態，使其成為 ETD 片段化的首選酶。

Lys-C 胰蛋白酶通常用于磷酸肽富集工作流程中，因為可在 N 和 C 端生成帶有伯胺的肽，可利用胺反應性同量異位標簽對片段進行雙標記。這導致肽電離增強和定量限提高，因為在 MS3 采集期間可重新分離更多碎片離子。該酶可用于溶液內或膠內酶切工作流程，以產生用于 LC-MS/MS 蛋白鑒別的肽。

在 37°C 下可在 2 小時內完成高效蛋白酶切。在高度變性條件下（如 8 M 尿素、2 M 鹽酸胍、1% SDS、2% CHAPS 和 40% 乙腈），Lys-C 蛋白酶可保持活性，并在 pH 7–9 條件下充分發揮作用（pH 8 下活性最大）。該凍干酶的質量為 30 kDa，在 –20°C 下儲存時可保持穩定 1 年。該 Lys-C 酶以凍干形式（20 µg 或 100 µg含量）包裝。

胰蛋白酶/Lys-C 蛋白酶混合物是胰蛋白酶和 LysC 蛋白酶的凍干混合物，已經過優化以提高蛋白酶切效率。盡管胰蛋白酶通常用于蛋白酶切，但單獨這一種蛋白酶并不足以完全酶切賴氨酸和精氨酸殘基的羧基端的蛋白。因此，Lys-C 蛋白酶通常與胰蛋白酶共同作用，以連續酶切蛋白，缺失切割較少。胰蛋白酶/Lys-C 蛋白酶混合物以 20 µg、5 x 20 µg 或 100 µg 靈活規格提供。根據酶與蛋白比值，酶切可在短短 1.5–3 小時內完成或者最長過夜完成。

胰凝乳蛋白酶、GluC、Asp-N 蛋白酶

• 增加序列覆蓋范圍—具有互補色譜、電離和片段化特性的重疊肽的蛋白表征結果較佳
• 高比活性—每種蛋白酶都具有極好的酶特異性
•穩定—以凍干形式提供

Asp-N 蛋白酶是一種 MS 級鋅金屬蛋白酶，來源于莓實假單胞菌的突變菌株，需要痕量鋅來維持活性。Asp-N 蛋白酶主要在半胱氨酸氧化產生的天冬氨酸和半胱氨酸的氨基側切割。也可能在谷氨酸殘基切割；但是，谷氨酰基殘基的切割率顯著低于天冬氨酸殘基的切割率。在 37°C 條件下，Asp-N 蛋白酶可在 2–20 小時內高效酶切蛋白，活性大于 20,000 單位/mg 蛋白，在變性條件（如 1 M 尿素、2 M 鹽酸·胍、0.1% SDS、2% CHAPS 和 10% 乙腈）下仍可保持活性，在 pH 6–8 條件下具有較佳活性。該凍干酶的質量為 27 kDa，在 -20°C 下儲存時可保持穩定 1 年。

Glu-C 蛋白酶也稱為 V-8 蛋白酶，是從金黃色葡萄球菌中分離獲得的 MS 級絲氨酸蛋白酶。Glu-C 蛋白酶特異性切割碳酸氫銨和醋酸銨緩沖液中谷氨酸殘基的羧基側，產生少量的肽片段。在磷酸鹽緩沖液中也可能在谷氨酸和天冬氨酸殘基切割。在 37°C 條件下，Glu-C 蛋白酶可在 5–18 小時內高效酶切蛋白，活性大于 500 單位/mg 蛋白，在變性條件（如 2 M 尿素、1 M 鹽酸胍、0.1% SDS、2% CHAPS 和 20% 乙腈）下仍可保持活性。在 pH 8 條件下，Glu-C 蛋白酶活性較佳。該凍干酶的質量為 27 kDa，在 -20°C 下儲存時可保持穩定 1 年。

胰凝乳蛋白酶是一種從牛胰腺中分離獲得的 MS 級胞內蛋白酶，特異性切割酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸和亮氨酸的羧基側。在牛胰腺中發現兩種主要形式的胰凝乳蛋白酶 A 和 B，其含量相等。它們是相似的蛋白質（80% 同源性），但具有不同的蛋白水解特征。Thermo Scientific 胰凝乳蛋白酶有兩種形式的胰凝乳蛋白酶。由于胰蛋白酶可能與天然來源的胰凝乳蛋白酶共純化，Thermo Scientific 胰凝乳蛋白酶經 TLCK 處理以消除可能的胰蛋白酶活性，提高酶切特異性。胰凝乳蛋白酶可以耐受溫和的變性條件，如 0.1% SDS、2 M 尿素、2 M 鹽酸·胍、1% CHAPS 和 30% 乙腈，在 pH 7.5–8.5 條件下具有較佳活性。該凍干酶的質量為 25 kDa，在 -20°C 下儲存時可保持穩定 1 年。