Cell Counting Kit-8（簡(jiǎn)稱(chēng)CCK-8），是一種基于WST-8而廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速、高靈敏度檢測(cè)的試劑盒。
CCK-8試劑中含有WST-8（化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽）是一種類(lèi)似于MTT的化合物，它在電子耦合試劑1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）存在條件下，可以被線(xiàn)粒體內(nèi)的脫氫酶還原為具有高度水溶性的橙黃色甲瓚產(chǎn)物Formazan （參考圖1），生成的Formazan數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比。因此可利用這一特性直接進(jìn)行細(xì)胞增殖和毒性分析，細(xì)胞增殖越多越快，則顏色越深；細(xì)胞毒性越大，則顏色越淺。
CCK-8與以往的增殖/毒性測(cè)定試劑相比，具有明顯優(yōu)點(diǎn)（參考表1）。CCK-8試劑盒具有靈敏度高、反應(yīng)時(shí)間短、線(xiàn)性范圍寬、數(shù)據(jù)可靠、重現(xiàn)性好等特點(diǎn)，可以廣泛應(yīng)用于藥物篩選、細(xì)胞增殖測(cè)定、細(xì)胞毒性測(cè)定、腫瘤藥敏試驗(yàn)。
表1. 增殖/毒性測(cè)定試劑的比較
|
檢測(cè)方法 |
MTT法 |
XTT法 |
WST-1法 |
CCK-8法 |
|
甲瓚產(chǎn)物的水溶性 |
差（需加有機(jī)溶劑溶解） |
好 |
好 |
好 |
|
檢測(cè)靈敏度 |
高 |
很高 |
很高 |
最高 |
|
檢測(cè)時(shí)間 |
較長(zhǎng) |
較短 |
較短 |
最短 |
|
檢測(cè)波長(zhǎng) |
560-600nm |
420-480nm |
420-480nm |
430-490nm |
|
細(xì)胞毒性 |
高，細(xì)胞形態(tài)完全消失 |
很低，細(xì)胞形態(tài)不變 |
很低，細(xì)胞形態(tài)不變 |
很低，細(xì)胞形態(tài)不變 |
|
試劑穩(wěn)定性 |
一般 |
較差 |
一般 |
很好 |
|
批量樣品檢測(cè) |
可以 |
非常適合 |
非常適合 |
非常適合 |
|
便捷程度 |
一般 |
便捷 |
便捷 |
非常便捷 |
Cell Counting Kit-8（簡(jiǎn)稱(chēng)CCK-8），是一種基于WST-8而廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速、高靈敏度檢測(cè)的試劑盒。
CCK-8試劑中含有WST-8（化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽）是一種類(lèi)似于MTT的化合物，它在電子耦合試劑1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）存在條件下，可以被線(xiàn)粒體內(nèi)的脫氫酶還原為具有高度水溶性的橙黃色甲瓚產(chǎn)物Formazan （參考圖1），生成的Formazan數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比。因此可利用這一特性直接進(jìn)行細(xì)胞增殖和毒性分析，細(xì)胞增殖越多越快，則顏色越深；細(xì)胞毒性越大，則顏色越淺。
CCK-8與以往的增殖/毒性測(cè)定試劑相比，具有明顯優(yōu)點(diǎn)（參考表1）。CCK-8試劑盒具有靈敏度高、反應(yīng)時(shí)間短、線(xiàn)性范圍寬、數(shù)據(jù)可靠、重現(xiàn)性好等特點(diǎn)，可以廣泛應(yīng)用于藥物篩選、細(xì)胞增殖測(cè)定、細(xì)胞毒性測(cè)定、腫瘤藥敏試驗(yàn)。
表1. 增殖/毒性測(cè)定試劑的比較
|
檢測(cè)方法 |
MTT法 |
XTT法 |
WST-1法 |
CCK-8法 |
|
甲瓚產(chǎn)物的水溶性 |
差（需加有機(jī)溶劑溶解） |
好 |
好 |
好 |
|
檢測(cè)靈敏度 |
高 |
很高 |
很高 |
最高 |
|
檢測(cè)時(shí)間 |
較長(zhǎng) |
較短 |
較短 |
最短 |
|
檢測(cè)波長(zhǎng) |
560-600nm |
420-480nm |
420-480nm |
430-490nm |
|
細(xì)胞毒性 |
高，細(xì)胞形態(tài)完全消失 |
很低，細(xì)胞形態(tài)不變 |
很低，細(xì)胞形態(tài)不變 |
很低，細(xì)胞形態(tài)不變 |
|
試劑穩(wěn)定性 |
一般 |
較差 |
一般 |
很好 |
|
批量樣品檢測(cè) |
可以 |
非常適合 |
非常適合 |
非常適合 |
|
便捷程度 |
一般 |
便捷 |
便捷 |
非常便捷 |
| 象形圖 | |
|---|---|
| 警示語(yǔ) | |
| Class | |
| 警告聲明 | |
| UNub | |
| 危險(xiǎn)聲明 | |
| Packing Group |
本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用。
版權(quán)所有：©2023 上海藍(lán)季科技發(fā)展有限公司 滬ICP備16037297號(hào)
上海工商 滬公網(wǎng)安備 16037297號(hào) 危險(xiǎn)品化學(xué)品經(jīng)營(yíng)許可證 營(yíng)業(yè)執(zhí)照（三證合一）
季_營(yíng)業(yè)執(zhí)照.png){kind=link}